用于小鼠视网膜血液成像的自适应光学OCT
发布时间:2025-01-09
示意图2 WFS变顶多示意图形及完全一致任左边同时借助的相应正弦连续病态B-scan。
热示意图当中一个WFS点(紫色实线外圈当中)以较较低的度数看出,在黑线任左边分离出相应的其中心分布。(a)不具非优化关键点的WFS示意图形。(b)优化光线侧重于胸部以外层拿到的WFS示意图形。 示意图3(b-d)为超声期间,WFS在AO校准年前后日志的除此以外对数误反之亦然和Zernike乘积测值。在AO校准年前,将肠道暗睛沿光轴填充,关键点设在以外胸部。AO校准年前的除此以外对数误反之亦然在0.2-0.6μm范围内,以散顶多和散光为主。激能活AO校准后,除此以外对数波年前误反之亦然减低到50 nm任左侧任左。手绘了8只肠道(仅有任左暗)校准年前后每个Zernike乘积的不等曲率半径(不等值标准规范偏反之亦然),演示的系统病态能指标(示意图3e)。
示意图3(a)用纸模在胸部梯形上测的系统覆没像反之亦然。(b)肠道超声反复当中RMS波年前误反之亦然的民族特色轨迹。用AO FD-OCT超声肠道胸部时,(c)AO校准年前和(d)校准反复当中测得的相应Zernike乘积。(e)对8只肠道样本测校准年前后Zernike乘积和标准规范反之亦然的不等值。
示意图4为肠道胸部自定义标准规范像素FD-OCT的系统的民族特色示意图形,以及来自不具类似光(侧向像素)的AO FD-OCT的系统示意图形。有文献也描述了主要用途借助这些示意图形的标准规范侧边像素啮齿昆虫FD-OCT的系统的光学的系统。都是,的系统的较低斯束腰(1∕e2)大约6.5μm、顶多深大约308μm(足以容纳肠道胸部的全部截面积)。标准规范像素FD-OCT示意图形的挖掘和处理与AO FD-OCT的系统示意图形始终保持一致。示意图5当中的标准规范像素B-scan由1.5 mm侧边图像短度拿到。所有主要的胸部层都可以在示意图形当中识别,且显然都是亮的。深蓝色实线框当中的手绘由AO FD-OCT的系统拿到,所用肠道与标准规范像素FD-OCT的系统超声所用肠道完全一致品系。手绘当中,与标准规范像素FD-OCT示意图形相对来说,AO FDOCT光线侧重在比胸部内层更是亮的胸部以外层。如预计,AO FD-OCT示意图形当中推论到的白白点宽明显多于标准规范像素FD-OCT示意图形当中的,从而强化了胸部层的可见病态。
示意图4 平常啮齿昆虫OCT B-scan与较低像素AO-OCT B-scan(AO-ON挖掘深蓝色实线框内)的来得。示意图形除此以外来自C57BL/6J(色素沉着)肠道,由20次运动校准B-scan不等产生。反馈除此以外采用正弦其中心连续病态。AO FD-OCT手绘上看到的白白点宽较小。制图100μm。
为了GISAO的系统对B-scan的受到影响,在AO的系统重新启动和敞开的才会,对同一胸部任左边挖掘了几组反馈,后用反之亦然分其中心连续病态看出结果。示意图5(a)为AO的系统重新启动(OFF)时的示意图形(flat DM),顶多梯形关键点在以外胸部上。示意图5(b)为AO开端(ON)时侧重于以外胸部的B-scan,示意图5(c)为侧重于内胸部的B-scan。AO校准激能活(AO-ON)时,B-scan更是亮(示意图5任左)。例如当AO被激能活并侧重在以外胸部时,OLM的测其中心增大了大约3倍(示意图5a和b)。关键点偏移的敏感度可以通过示意图5(b和c)当中相应胸部层的其中心变化来推论。
示意图5 完全一致微小率下拿到的C57BL/6J(色素沉着)肠道胸部细胞内OCT B-scan示意图形(任左侧),及最深处-其中心曲线(任左)。
(a)AO重新启动时(DM flat)借助,(b)AO激能活并将关键点设在以外胸部时借助,(c)AO激能活并通过AO硬件将关键点转到到内胸部时借助。示意图形(a)、(b)和(c)通过不等20次B-scan分解,并以反之亦然分其中心连续病态再现。制图50μm。 激能活AO的系统后,可以通过转变AO控制硬件当中的离顶多量来调整顶多梯形任左边。在肠道胸部的B-scan示意图形当中,可以系统会推论到顶多梯形任左边的变化,因为顶多梯形上各层的度数相当大增大。从光栅图像拿到的AO FD-OCT个数固定式示意图当中分离出肠道胸部的en face示意图形,垂直叠加的B-scan帧宽度为0.6μm。示意图6为胸部上皮细胞层(RNFL)、内网状层(IPL)和以外网状层(OPL)的民族特色示意图形。截面积示意图形当中括号上图为侧重层及创立en face示意图形所需的示意图层范围。在同一任左边挖掘四组个数固定式反馈,用完全一致参数展开这两项,并在完全一致的反之亦然分其中心连续病态上再现。深蓝色实线框当中的示意图形反馈沿短轴不等,以分解任左侧的其中心示意图(蓝色线透露AO-ON,紫色实线透露AO-OFF)。AO激能活后RNFL当中上皮细胞以及IPL和OPL当中上皮细胞壁的锐度和度数赢取更佳(示意图7)。在AO-OFF才会,只有OPL(示意图6f)不具够大的敏感度以使得很难与对应的AO-ON示意图形(示意图6c)展开来得,任左栏的菱形示意图形当中可推论到上皮细胞壁其中心有2-3倍的增大。
示意图6 用AO FD-OCT的系统细胞内拿到的肠道胸部截面积示意图形。通过转变AO控制硬件当中的离顶多量,将顶多梯形设在胸部内部。B-scan当中括号上图的侧向最深处代表多种不同胸部层的en face透视,分成AO-ON时(a-c)和AO-OFF(DM梯形)时(d-f)。制图30μm。 示意图7看出了与示意图6上图多种不同的昆虫胸部示意图形。GIS了多种不同的上皮细胞壁丛层和光学层(PRL),可见其中心和像素提较低(胸部上皮细胞壁宽提较低)。示意图7(c和g)当中的深蓝色实线框透露在AO敞开和重新启动的才会测几个多种不同宽上皮细胞壁宽的任左边。相应的折线示意图已标准规范化(示意图7上部1、2和3)。不等而言,用AO-ON测的上皮细胞壁直径比AO重新启动时大约粗大2.5×。
示意图7 用AO FD-OCT的系统细胞内拿到的肠道胸部截面和en face示意图形(IPL、INL、OPL和PRL)。通过转变AO控制硬件当中的离顶多,在很感兴趣层上调整顶多梯形,如B-scan示意图形当中的紫色括号。B-scan当中括号上图的侧向最深处分别透露AO-ON(a-d)和AO-OFF(DM梯形)(e-h)时同一任左边多种不同胸部层的en face透视的任左边。上部为c和g当中标记1、2和3的任左边处上皮细胞壁示意图形其中心的标准规范化线示意图。制图30μm。
结论与讨论
本文参阅了一种主要用途青蛙胸部超声的AO FD-OCT的系统,的系统运用于同一光做超声光和波年前光学光。为了便于肠道超声,运用于地中主透帮助填充闭并消除视网膜屈光。细胞内实验者结果表明,肠道胸部示意图形当中上皮细胞壁和上皮细胞束的度数和敏感度赢取了更佳。
渐进光学胸部超声的关键是精确的波年前潜意识。对于青蛙如松鼠,尤为不具挑战病态。本文AO FD-OCT的系统的其设计特点之一是运用于了地中主透消除热气-视网膜界面的反射光,而不是用顶多梯形侧重光。该方固定式通过复合快速移动地中主透和暗睛,使光可以很容易地侧重在以外胸部上,从而拿到单峰较低质量的波年前示意图形。此以外,通过运用于单一光线展开波年前光学和FD-OCT,很难通过推论B-scan系统会侦测超声光线侧重的胸部区域。由于被超声的暗睛与地中视网膜接触,有效减少了视网膜湿气和清澈。运用于顶多梯形将光侧重在胸部上显然都会使产生示意图形梯形的曲率场与肠道胸部的曲率不匹配,但本文不存在这个问题,因为AO FD-OCT图像的区域并不大,如示意图5-7当中的B-scan示意图形上图,胸部表面都会在短距离内是宽阔的。
作上的的系统其设计当中,不能运用于肠道胸部的全部NA。预计像素所需提较低两倍才能用较低敏感度来辨识截面积示意图形和en face示意图形当中完整的光感受器人像。与cSLO多种不同,OCT的侧向像素远大于光的带宽;为了拿到超较低的侧向像素,所需很宽的光谱线带宽。这给AO-OCT造成了额以外的挑战,因为随着光谱线变短,色反之亦然将开始受到影响如示意图上图个数。所需进一步详细深入研究这些色反之亦然的受到影响,以借助肠道暗睛的完整NA。此以外,关键点的最深处与如示意图上图的个数相耦合;如示意图上图宽较小都会使关键点最深处相当小,多于PRLs截面积。所幸OCT灵敏度相当较低,离顶多本体基本上可见,但其中心和像素减低。
未有来深入研究所需提较低的系统的像素和侧重最深处。首先使修正屈光病态AO的系统,以便通过更是大的视网膜个数对肠道展开超声,从而提较低可发挥作用的作侧边像素。此以外在啮齿昆虫AO-OCT的系统当中自组SLO超声连接处(类似Zawadzki等人提出的人胸部超声其设计),将准许运用于光病毒学当中的新型荧光分子探针,从肠道细胞内同时拿到本体和潜在功用反馈。另以外在不战死沙场AO给予的侧边像素的才会,探究延短AO-FDOCT的系统侧重最深处的作法。目年前为止几种显然的较低NA OCT超声解决方案,包括运用于动态侧重、发挥作用贝塞尔光线超声或在AO-OCT的系统当中扩展附加像反之亦然等。之后的年前提是借助渐进光学新技术提较低侧边像素,发挥作用细胞内光感受器的细胞膜级像素超声。
概述:Jian, Y. , R. J. Zawadzki , and M. V. Sarunic . "Adaptive optics optical coherence tomography for in vivo mouse retinal imaging." Journal of Biomedical Optics 18(2013).
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